- 和子涵;穆广亚;贾一然;张晓彤;冯军厂;常绪路;张建新;
为了提高β-甘露聚糖酶的活性及稳定性,通过基因克隆技术克隆并表达了一株分离自椰果的内生枯草芽孢杆菌YZ-21(Bacillus subtilis YZ-21)β-甘露聚糖酶基因ManA,并使用3,5-二硝基水杨酸法(DNS)测定了酶活性及稳定性。结果表明:β-甘露聚糖酶基因ManA序列全长1 104 bp,与相同来源的β-甘露聚糖酶同源性高达97.56%,具有ManA保守结构域,符合糖苷水解酶家族GH26的典型特征。将ManA连接到pET-32a表达载体上,构建重组表达质粒pET-ManA,并导入大肠杆菌BL21(DE),经诱导获得了β-甘露聚糖酶基因ManA的高效表达。表达产物经过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)凝胶电泳分析,显示条带大小约为56.07 ku。重组酶活性为372.86 U/mL,酶学性质研究发现其最适反应温度为40℃,最适pH为7.0,最佳反应底物是瓜豆胶,酶活性能够达到392.54 U/mL。在55℃处理120 min后,酶活仍保留69.8%,pH为4.0~9.0时处理30 min后酶活性均能保留60%以上,且金属离子Ca~(2+)、Co~(2+)、Ba~(2+)对重组酶有明显激活作用。综上所述,从内生枯草芽孢杆菌YZ-21中克隆的β-甘露聚糖酶基因能在大肠杆菌中高效表达,并具有良好的稳定性。
2023年15期 v.44;No.684 71-78页 [查看摘要][在线阅读][下载 2984K] [下载次数:302 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:0 ] - 尤巧;李焱辉;王彤;赵陆宇;彭文婷;王欣雨;林凌;黄炜乾;
为了开发新型的抗生素替代品,试验分离鉴定了一株贝莱斯芽孢杆菌BzAH-1,对其产生的抗菌代谢产物的抑菌机制、耐性、应用效果等方面进行研究。通过发酵生产获得了其抗菌代谢物,测定其抑菌圈的大小。通过抑菌试验研究了抗菌代谢物的抑菌效果、热稳定性、酸碱耐受性以及可能的抑菌机制。结果表明:该抗菌代谢物质热稳定性较好,70℃水浴24 h对其活性无任何影响;对pH 2~11范围内的缓冲液耐受性较高;作为代谢物制剂添加到饲料中,能够显著提高蛋鸡产蛋率,降低料蛋比和死亡率。贝莱斯芽孢杆菌BzAH-1的代谢抗菌物具良好的抗菌活性、耐高温和耐酸碱性,具有较强的应用价值。
2023年15期 v.44;No.684 79-85页 [查看摘要][在线阅读][下载 2210K] [下载次数:586 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:0 ] - 蒋慧;胡光辉;刘晓芳;林淼;
试验为检测从荷斯坦奶牛瘤胃中分离的三株牛链球菌(Streptococcus equinus, S. equinus)对苜蓿青贮品质的影响,将植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum, L. plantarum)FE-1(CB组)、牛链球菌ON182139(S1组)、ON182142(S2组)、ON221850(S3组)等乳酸菌用于新鲜苜蓿青贮,以不额外接种乳酸菌作为对照组(CON),在青贮的3、6、12、30 d和60 d,分别取出青贮苜蓿,测定化学成分、发酵品质、微生物数量和有氧稳定性。结果表明:(1)第60天,与CON组相比,各添加乳酸菌组均显著降低了干物质损失(P<0.05),但牛链球菌组与植物乳杆菌组之间差异不显著(P>0.05)。(2)与CON组相比,相同添加量的乳酸菌组苜蓿的酸性洗涤纤维(ADF)、pH、氨态氮(NH_3-N)和好氧菌群显著降低(P<0.05),但牛链球菌组和植物乳杆菌组之间差异不显著(P>0.05)。(3)对于粗蛋白(CP),与CON组相比,S3组与CB组显著降低了CP损失(P<0.05),但牛链球菌组与植物乳杆菌组组之间差异不显著(P>0.05)。(4)S3组乳酸(LA)和乙酸(AA)均显著升高(P<0.05),且与CB组差异显著(P<0.05)。牛链球菌的添加对提高苜蓿青贮品质有一定的积极作用,牛链球菌可以应用于苜蓿青贮中。
2023年15期 v.44;No.684 86-92页 [查看摘要][在线阅读][下载 2090K] [下载次数:188 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:0 ] - 杨梦瀚;苗华彪;宋婧楠;赵香帅;陈紫娴;吴倩;黄遵锡;
试验旨在探究地衣芽孢杆菌38(Bacillus licheniformis 38,B38)对产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,CP)的抑菌性能,以期为新型替抗产品的开发提供基础。采用抑菌圈法对48株芽孢杆菌经过两次筛选,获得一株对CP抑菌效果最好的芽孢杆菌,测定其最小抑菌效价、抑菌产物生成曲线、抑菌谱和代谢产物的稳定性,并通过硫酸铵沉淀法对抗菌物质进行粗提取。结果表明:B38对CP的抑菌圈直径最大可达31.14 mm,其发酵上清液的最小抑菌效价为64 AU/mL,主要对革兰氏阳性菌发挥抑菌作用;B38代谢产物的抑菌活性在6~<12 h呈指数增长,在12~<24 h保持稳定;B38代谢产物经胃蛋白酶、胰蛋白酶、蛋白酶K和过氧化氢酶处理后,抑菌活性均大于87.78%,对温度和pH具有良好的耐受性;B38代谢产物中的抑菌物质可以被80%硫酸铵完全沉淀,通过该方法获得的抗菌粗品的MIC为6.25 mg/mL。试验通过抑菌圈法筛选得到了一株对CP具有优良抑菌性能的菌株B38,其发酵产物对蛋白酶、温度和pH具有优良的耐受能力。
2023年15期 v.44;No.684 92-99页 [查看摘要][在线阅读][下载 2061K] [下载次数:608 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:0 ]