产毒黄曲霉颉颃菌的筛选及复合菌剂的构建Screening of Antagonistic Organism Against Toxin-Producing Aspergillus flavus and Preparation of Complex Strains Agents
黎欢,祁姣姣,彭玉莉,梁嘉旭,秦海啸,胡文锋
摘要(Abstract):
研究旨在获得能抑制产毒黄曲霉生长及产毒的高效能复合菌剂。用紫外荧光法和平板对峙法筛选出不产毒且能抑制产毒黄曲霉的颉颃菌株,应用形态学、分子生物学方法鉴定初筛菌株,通过牛津杯法测定初筛菌的发酵液对产毒黄曲霉及其初筛菌生长的影响,基于正交试验获得直观最佳抑制产毒黄曲霉生长及产毒的复合菌剂配方。结果表明:从土壤中筛选出的4株霉菌,分别鉴定为木霉(A-1、A-2)、曲霉(F-501)以及青霉(Q-281),对产毒黄曲霉生长的抑制率为木霉A-1 51%、木霉A-2 66%、曲霉F-501 61%、青霉Q-281 53%。A-1发酵液对产毒黄曲霉生长的抑制效果最明显,抑菌圈直径为18.00 mm。F-501、A-1发酵液分别对A-1、Q-281有抑制作用,抑菌圈直径分别为12.22、8.12 mm。A-2发酵液对A-1、F-501有抑制作用,抑菌圈直径均为10.52 mm。正交试验直观最优复合菌剂的配方:A-1、A-2、Q-281孢子浓度分别为1×10~4、1×10~6、1×10~6个/mL,其对黄曲霉毒素B1(AFB1)生成的抑制率为75%。分离得到的4株不产毒霉菌对产毒黄曲霉的生长抑制率均达到50%以上,复合菌剂对产毒黄曲霉的生长及产毒的抑制率为75%,可为从源头降解黄曲霉毒素提供候选菌株或复合菌剂。
关键词(KeyWords): 黄曲霉;不产毒霉菌;抑制作用;正交试验;复合菌剂
基金项目(Foundation): 热带亚热带农业微生物种质资源研究与选育(现代种业)[2018B020205003]
作者(Author): 黎欢,祁姣姣,彭玉莉,梁嘉旭,秦海啸,胡文锋
DOI: 10.13302/j.cnki.fi.2022.01.010
参考文献(References):
- [1]居乃琥.黄曲霉毒素[M].北京:轻工业出版社,1980.
- [2]吴凤琪,岳振峰,张毅,等.食品中主要霉菌毒素分析方法的研究进展[J].色谱,2020,38(7):759-767.
- [3]孙长坡,常晓娇,伍松陵,等.利用PCR-RFLP方法鉴别黄曲霉毒素产毒菌株[J].中国农业科学,2014,47(18):3675-3683.
- [4]IARC.Some naturally occurring substances:food items and constituents,heterocyclic aromatic amines,and myeotoxirts[J].IARCMonographs on the Evaluation of Carcinogenic Risks to Humans,1993(56):245-362.
- [5]张初署,刘阳,邢福国,等.七种培养基对黄曲霉分离效果的比较[J].核农学报,2013,27(2):208-212.
- [6]韩愈杰.黄曲霉拮抗菌株的分离筛选及对黄曲霉毒素的降解效果[D].硕士学位论文.保定:河北农业大学,2015:17.
- [7]董宏鑫,时铭泽.土壤微生物分离与测定[J].吉林农业,2018(20):72.
- [8]沈唯军,时晨,丁婷.“土壤中微生物的分离、培养与鉴定”实验设计[J].实验教学与仪器,2016,33(12):38-39,45.
- [9]贾珍珍.黄曲霉产毒菌株的快速筛选实验[J].微生物学志,1986(1):50-52.
- [10]温晨阳,李子桀,周洪友.马铃薯黄萎病生防木霉菌的分离与筛选[J].北方农业学报,2017,45(5):59-64.
- [11]沈萍,陈向东.微生物学实验[M].北京:高等教育出版社,2010.
- [12]魏景超.真菌鉴定手册[M].上海:上海科学技术出版社,1979.
- [13]岳娟,王培娇,韩彦卿,等.谷子白发病卵孢子重寄生真菌的分离鉴定[J].山西农业科学,2021,49(1):82-86,104.
- [14]孙杰,张初署,赵红军,等.一株不产黄曲霉毒素的黄曲霉菌PEASH-12及其用途:110157626[P].2019-08-23.
- [15]国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].2015年版.四部.北京:中国医药科技出版社,2015.
- [16]汪穗福.药品生物检定技术[M].北京:中国医药科技出版社,2000.
- [17]徐杨玉,刘付香,洪彦彬,等.绿色木霉对花生黄曲霉毒素污染的防治[J].热带生物学报,2019,10(4):367-371.
- [18]周璞,王涛,刘硕,等.利用响应面回归设计研制降解黄曲霉毒素和玉米赤霉烯酮的复合益生菌[J].饲料工业,2020,41(20):51-55.